目的觀察作為綠茶主要活性成分的表沒食子兒茶素沒食子酸醋（EGCG）對高糖環(huán)境下足細胞增殖和凋亡的作用并探討其機制。方法將足細胞分為9組。組1：正常糖（5．6mmol／L）。組2：正常糖（5．6mmol／L）＋0．1mmol／LH2O2。組3：DMEM高糖（25mmol／L）。組4：20μmol／LEGCG＋DMEM高糖（25mmol／L）。組5：2．0μmol／I，EGCG＋DMEM高糖（25mmol／L）。組6：0．2μmol／LEGCG＋DMEM高糖（25mmol／L）。組7：0．2mmol／L維生素E＋DMEM高糖（25mmol／L）。組8：0．1μmol／L EGCG＋0．1mmol／L維生素E＋DMEM高糖（25mmol／L）。組9：24．4mmol／L甘露醇＋5．6mmol／L葡萄糖。采用溴脫氧核苷尿嘧啶（Brdu）酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測細胞增殖，在Hoechst染色共聚焦激光顯微鏡下觀察不同濃度EGCG作用24h對足細胞凋亡的影響，采用Annexin V-FITC法檢測足細胞凋亡，CM—H2DCFDA熒光探針檢測足細胞內(nèi)活性氧（ROS）生成。結果①足細胞增殖：與組1比較，組2在刺激24h時的足細胞增殖的光密度（D）450值無顯著變化（P〉0．05），48和72h時D。s。值均顯著降低（P值均〈0．05）。與組2比較，組7和組8高糖刺激24h時的D450值顯著升高（P值均〈0．05），組4、組5和組6無顯著變化（P值均〉0．05）；組4、組7和組8在刺激48、72h時的D450值顯著升高（P值均〈0．01）。②激光共聚焦顯微鏡下，凋亡細胞表現(xiàn)為較多的核固縮，DNA濃縮并向核膜靠攏，核質比減小，以及胞膜皺縮等早期凋亡形態(tài)學變化。組2、組3的足細胞凋亡較組1增加，組7明顯少于組4、組5，組9較組2無明顯增加。③不同濃度EGCG作用后，組4、組5、組8的早期凋亡細胞膜聯(lián)蛋白V（＋）PI（-）比例和壞死細胞膜聯(lián)蛋白V（＋）PI（＋）V（＋）比例均顯著低于組2（P值均〈o．05）；組4、組8的早期凋亡細胞膜聯(lián)蛋白V（＋）PI（-）比例均顯著低于組7（P值均〈0．05）。④與組2比較，組424h時的ROS顯著減少（P〈0．05），但組6無顯著改變（P〉0．05）；與組7比較，組424h時的ROS顯著減少（P〈0．05），6、12h時無顯著變化（P值均〉0．05）。結論EGCG（20μmol／L）作用72h促進高糖環(huán)境下足細胞增殖，EGCG降低高糖刺激下小鼠足細胞凋亡的作用可能是通過減少足細胞ROS的生成實現(xiàn)的。
完成機構：上海交通大學附屬第一人民醫(yī)院腎內(nèi)科,200080
